Цель работы — исследовать среднюю локальную жесткость мембраны при воздействии мембранных модификаторов, Материалы и методы. Забор крови производили у трех здоровых доноров при профилактических осмотрах в мик-роветты (Sarstedt AG and Co., Germany), содержащие ЭДТА. В данной серии опытов действовали на эритроциты модификатором наноповерхности мембран — гемином (солянокислый гематин). Гемин нарушает конформацию спектри-на, белка band 4,1 и ослабляет связь между ними [19]. Добавляли гемин в кровь in vitro. Концентрация гемина в крови составляла 1,8 мМ. Изображения клеток и их мембран получали с помощью АСМ [16] NTEGRA Prima, (NT-MDT, Russia). Жесткость мембран оценивали с помощью метода атомно-силовой спектроскопии. Результаты. После воздействия гемина в 68% случаях средняя жесткость увеличилась по сравнению с контрольным средним значением в 2,1 раза (р<0,05), что могло снизить ID на «30 %. Последующее воздействие перфторана возвращало жесткость мембраны в 85 % случаев к исходным значениям. Жесткость мембраны остальных 15% областей на клетках оставалась высокой — в 2,3 раза больше контроля (р<0,05), даже несмотря на воздействие перфторана. Выводы. Таким образом, с помощью атомно-силовой спектроскопии измерена средняя локальная жесткость мембраны, которая зависела от воздействия на нее мембранных модификаторов, в частности гемина. Ключевые слова: эритроцит, жесткость мембраны, атомно-силовая спектроскопия, гемин.
Objective: to study the average local tension of a membrane upon exposure to its modifiers. Materials and methods. Blood from 3 healthy donors was sampled into ethylene diamine tetraacetate-containing microvettes (Sarstedt AG and Co., Germany) during prophylactic examinations. In this series of experiments, the red blood cells were exposed to the membrane nanosurface modifier hemin (muriatic hematin). Hemin disrupts the conformation of spectrin, a band 4.1 protein, and weakens their bond [19]. Hemin was added to blood in vitro. Its blood concentration was 1.8 mM. The images of cells and their membranes were obtained on a NTEGRA Prima atomic force microscope (NT-MDT, Russia) [16]. The membrane tension was estimated by atomic force spectroscopy. Results. After exposure to hemin, 68% of cases showed a 2.1-fold increase in the average tension as compared to the mean control value (p<0.05), which could reduce ID by «30 %. Subsequent exposure to perftoran returned the membrane tension to the baseline values in 85% of cases. The membrane tension of other 15% of the areas on the cells remained high — 2.3 times higher than the control values (p<0.05) even despite the action of perftoran. Conclusion. Thus, atomic force spectroscopy was used to measure the average local tension of the membrane, which depended on exposure to its modifiers, such as hemin. Key words: red blood cell, membrane tension, atomic force spectroscopy, hemin.