rmtОбщая реаниматологияGeneral Reanimatology1813-97792411-7110FSBI "SRIGR" RAMS10.15360/1813-9779-2018-6-28-40rmt-1723Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯEXPERIMENTAL STUDIESТрансплантация пластов мезенхимальных прогениторных клеток сердца для васкуляризации миокарда после инфарктаTransplantation of Cardiac Mesenchymal Progenitor Cell Sheets for Myocardial Vascularization after an Infarction (Experimental Study)ДергилевК. В.DergilevKonstantin V.

121552, Москва, ул. 3-я Черепковская, д. 15а

15а 3rd Cherepkovskaya Str., 121552 Moscow

doctorkote@gmail.comЦоколаеваЗ. И.TsokolaevaZoya I.

121552, Москва, ул. 3-я Черепковская, д. 15а;

107031, Москва, ул. Петровка, д.25, стр. 2

15а 3rd Cherepkovskaya Str., 121552 Moscow;

25 Petrovka Str., Bldg. 2, 107031 Moscow

РыжковИ. А.RyzhkovIvan A.

107031, Москва, ул. Петровка, д.25, стр. 2

25 Petrovka Str., Bldg. 2, 107031 Moscow

ПарфеноваЕ. В.ParfenovaElena V.

121552, Москва, ул. 3-я Черепковская, д. 15а;

119192, г. Москва, Ломоносовский пр-т, д. 31-5

15а 3rd Cherepkovskaya Str., 121552 Moscow;

1 Universitetskaya Plaza, 119234 Moscow

Институт экспериментальной кардиологии, Национальный медицинский исследовательский центр кардиологии Минздрава РоссииРоссияInstitute of Experimental Cardiology, National Medical Research Center of Cardiology, Ministry of Health of RussiaRussian FederationИнститут экспериментальной кардиологии, Национальный медицинский исследовательский центр кардиологии Минздрава России; НИИ общей реаниматологии им. В. А. Неговского ФНКЦ РРРоссияInstitute of Experimental Cardiology, National Medical Research Center of Cardiology, Ministry of Health of Russia; V. A. Negovsky Research Institute of General Reanimatology, Federal Research and Clinical Center of Intensive Care Medicine and RehabilitologyRussian FederationНИИ общей реаниматологии им. В. А. Неговского ФНКЦ РРРоссияV. A. Negovsky Research Institute of General Reanimatology, Federal Research and Clinical Center of Intensive Care Medicine and RehabilitologyRussian FederationИнститут экспериментальной кардиологии, Национальный медицинский исследовательский центр кардиологии Минздрава России; Факультет Фундаментальной медицины, Московский государственный университет им. М. В. ЛомоносоваРоссияInstitute of Experimental Cardiology, National Medical Research Center of Cardiology, Ministry of Health of Russia; M. V. Lomonosov Moscow State UniversityRussian Federation2018261220181462840Copyright © Дергилев К.В., Цоколаева З.И., Рыжков И.А., Парфенова Е.В., 20182018Дергилев К.В., Цоколаева З.И., Рыжков И.А., Парфенова Е.В.Dergilev K.V., Tsokolaeva Z.I., Ryzhkov I.A., Parfenova E.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.reanimatology.com/rmt/article/view/1723

Цель. Разработать способ получения тканеинженерных конструкций (ТИК), на основе резидентных мезенхимальных прогениторных клеток (МПК) сердца человека и оценить влияние трансплантации ТИК на регенеративные процессы в сердце на модели инфаркта миокарда крысы.Материалы и методы. Резидентные МПК человека выделяли из ушка правого предсердия пациентов с ИБС. По аналогичному протоколу выделяли МПК крысы линии Wistar. Методом проточной цитофлуориметрии определяли иммунофенотип МПК. На основе пластов МПК сердца человека и крыс получали соответствующие ТИК. Инфаркт миокарда у крыс был индуцирован путем перевязки передней нисходящей коронарной артерии, после чего проводили трансплантацию ТИК. Через 30 дней после трансплантации выполняли эвтаназию. Проводили гистологическую оценку состояния клеток имплантата и васкуляризации, морфометрический анализ, трекинг дифференцировочной способности МПК, определение содержания ростовых факторов методом твердофазного ИФА. Статистическую оценку достоверности различий проводили с использованием программного пакета Statistica 8.0.Результаты. Анализ полученных клеточных конструкций показал, что они состоят из нескольких слоев клеток, взаимодействующих между собой при помощи коннексин–43, и характеризуются хорошей жизнеспособностью клеток в составе ТИК. Количество сосудов в периинфарктной области под трансплантатом из МПК было значительно больше, чем в контрольной группе, с признаками дифференцировки трансплантированных МПК сердца в эндотелиальные клетки сосудов.Увеличение васкуляризации сочеталось с увеличением площади участков жизнеспособного миокарда, уменьшением дилатации полости ЛЖ. Анализ продуктов секреции МПК сердца показал, что они продуцируют важнейшие факторы роста и цитокины, регулирующие ангиогенез и миграцию стволовых клеток.Заключение. Стратегия использования эпикардиальной трансплантации ТИК на основе пластов из МПК представляется рациональным подходом для эффективной доставки жизнеспособных стволовых/прогениторных клеток в поврежденный миокард. Применение ТИК способствует уменьшению или временному исключению действия факторов, способствующих прогрессирующей дисфункции сердца, путем локального паракринного воздействия и активации процессов реваскуляризации зоны повреждения.

Purpose. To develop a method of producing tissue-engineered constructs (TECs) on the basis of resident mesenchymal progenitor cells (MPC) of the human heart and to assess the effect of TECs transplantation on regenerative processes in the heart using a model of myocardial infarction in rats.Materials and methods. Human resident MPCs were isolated from the right atrial auricle of CAD patients. A similar protocol was used to obtain MPCs from Wistar rats. The MPC immunophenotype was determined by cytofluorometry. Corresponding TECs were obtained on the basis of MPC sheets of human and rats' hearts. Myocardial infarction in rats was induced by ligation of the anterior descending coronary artery followed by TEC transplantation. Euthanasia was performed 30 days after the transplantation. Histological examination of the implant and vascularization cells, morphometric analysis, tracking of the MPC differentiation ability, determination of the content of growth factors by solid-phase ELISA were carried out. Statistical evaluation of the significance of differences was performed using the Statistica 8.0 software package.Results. The analysis of the obtained cell constructs showed that they consisted of several layers of cells interacting with each other by means of connexin 43 and were characterized by good cell viability as a part TECs. The number of vessels in the peri-infarction area under the transplant from the MPC was significantly higher than that in the reference group with signs of differentiation of cardiac MPCs transplanted into endothelial vascular cells.The increased vascularization was combined with an increase in the area of viable myocardial sites and a decrease in LV cavity dilation. Analysis of the cardiac MPC secretion products showed that they produce the most important growth factors and cytokines that regulate angiogenesis and migration of stem cells.Conclusion. The strategy of using epicardial TEC transplantation based on MPC sheets seems to be a rational approach for effective delivery of viable stem/progenitor cells to the damaged myocardium. The use of TEC helps to reduce or temporarily eliminate the effect of factors that contribute to progressive heart dysfunction by local paracrine exposure and activation of the revascularization processes in the affected zone.

мезенхимальные прогениторные клеткиинфаркт миокардаваскуляризациятканеинженерная конструкция из пласта клетокmesenchymal progenitor cellsmyocardial infarctionvascularizationtissue engineering constructs from a cell sheetReferencesЛихванцев В.В., Убасев Ю.В., Скрипкин Ю.В., Забелина Т.С., Сунгуров В.А., Ломиворотов В.В., Марченко Д.Н. Предоперационная профилактика сердечной недостаточности в некардиальной хирургии. Общая реаниматология. 2016; 12 (3): 48–61. DOI: 10.15360/18139779-2016-3-48-61Likhvantsev V.V., Ubasev Y.V., Skripkin Y.V., Zabelina T.S., Sungurov V.A., Lomivorotov V.V., Marchenko D.N. Preoperative prevention of heart failure in noncardiac surgery. Obshchaya Reanimatologiya = General Reanimatology. 2016; 12 (3): 48–61. DOI: 10.15360/1813-9779-2016-3-48-61. [In Russ., In Engl.]Мороз В.В., Марченко Д.Н., Скрипкин Ю.В., Забелина Т.С., Овезов А.М., Лихванцев В.В. Периоперационные предикторы неблагоприятного исхода сосудистых вмешательств. Общая реаниматология. 2017; 13 (3): 6–12. DOI: 10.15360/1813-9779-2017-3-6-12Moroz V.V., Marchenko D.N., Skripkin Y.V., Zabelina T.S., Ovezov A.M., Likhvantsev V.V. Perioperative predictors of unfavorable outcome of vascular surgery. Obshchaya Reanimatologiya = General Reanimatology. 2017; 13 (3): 6–12. DOI: 10.15360/1813-9779-2017-3-6-12. [In Russ., In Engl.]Дергилев К.В., Рубина К.А., Цоколаева З.И., Сысоева В.Ю., Гмызина А.И., Калинина Н.И., Белявская Т.М., Акчурин Р.С., Парфенова Е.В., Ткачук В.А. Аневризма левого желудочка — возможный источник резидентных стволовых клеток сердца. Цитология. 2010; 52 (11): 921–930. PMID: 21268851Dergilev K.V., Rubina K.A., Tsokolaeva Z.I., Sysoeva V.Yu., Gmyzina A.I., Kalinina N.I., Belyavskaya T.M., Akchurin R.S., Parfenova E.V., Tkachuk V.A. Left ventricular heart aneurism-a new source of resident cardiac stem cells. Tsitologiya. 2010; 52 (11): 921–930. PMID: 21268851. [In Russ.]Дергилев К.В., Цоколаева З.И., Рубина К.А., Сысоева В.Ю., Макаревич П.И., Болдырева М.А., Белоглазова И.Б., Зубкова Е.С., Шаронов Г.В., Акчурин Р.С. Выделение и характеристика прогениторных клеток сердца из миокарда ушка правого предсердия. Цитология. 2016; 58 (5): 340–348.Dergilev K.V., Tsokolaeva Z.I., Rubina K.A., Sysoeva V.Y., Makarevich P.I., Boldyreva M.A., Beloglazova I.B., Zubkova E.S., Sharonov G.V., Akchurin R.S., Parfyonova Y.V. Isolation and characterization of cardiac progenitor cells obtaining from myocardial right atrial appendage tissue. Tsitologiya. 2016; 58 (5): 340–348. PMID: 30188625. [In Russ.]Dergilev K.V., Makarevich P.I., Tsokolaeva Z.I., Boldyreva M.A., Beloglazova I.B., Zubkova E.S., Menshikov M.Yu., Parfyonova Y.V. Comparison of cardiac stem cell sheets detached by Versene solution and from thermoresponsive dishes reveals similar properties of constructs. Tissue Cell. 2017; 49 (1): 64–71. DOI: 10.1016/j.tice.2016.12.001. PMID: 28041835Dergilev K.V., Makarevich P.I., Tsokolaeva Z.I., Boldyreva M.A., Beloglazova I.B., Zubkova E.S., Menshikov M.Yu., Parfyonova Y.V. Comparison of cardiac stem cell sheets detached by Versene solution and from thermoresponsive dishes reveals similar properties of constructs. Tissue Cell. 2017; 49 (1): 64–71. DOI: 10.1016/j.tice.2016.12.001. PMID: 28041835Traktuev D.O., Tsokolaeva Z.I., Shevelev A.A., Talitskiy K.A., Stepanova V.V., Johnstone B.H., Rahmat-Zade T.M., Kapustin A.N., Tkachuk V.A., March K.L., Parfyonova Y.V. Urokinase gene transfer augments angiogenesis in ischemic skeletal and myocardial muscle. Mol. Ther. 2007; 15 (11): 1939–1946. DOI: 10.1038/sj.mt.6300262. PMID: 17653104Traktuev D.O., Tsokolaeva Z.I., Shevelev A.A., Talitskiy K.A., Stepanova V.V., Johnstone B.H., Rahmat-Zade T.M., Kapustin A.N., Tkachuk V.A., March K.L., Parfyonova Y.V. Urokinase gene transfer augments angiogenesis in ischemic skeletal and myocardial muscle. Mol. Ther. 2007; 15 (11): 1939–1946. DOI: 10.1038/sj.mt.6300262. PMID: 17653104Zhang Y., Sivakumaran P., Newcomb A.E., Hernandez D., Harris N., Khanabdali R., Liu G.S., Kelly D.J., Pébay A., Hewitt A.W., Boyle A., Harvey R., Morrison W.A., Elliott D.A., Dusting G.J., Lim S.Y. Cardiac repair with a novel population of mesenchymal stem cells resident in the human heart. Stem Cells. 2015; 33 (10): 3100–3113. DOI: 10.1002/stem.2101. PMID: 26184084Zhang Y., Sivakumaran P., Newcomb A.E., Hernandez D., Harris N., Khanabdali R., Liu G.S., Kelly D.J., Pébay A., Hewitt A.W., Boyle A., Harvey R., Morrison W.A., Elliott D.A., Dusting G.J., Lim S.Y. Cardiac repair with a novel population of mesenchymal stem cells resident in the human heart. Stem Cells. 2015; 33 (10): 3100–3113. DOI: 10.1002/stem.2101. PMID: 26184084Taghavi S., Sharp T.E.3rd, Duran J.M., Makarewich C.A., Berretta R.M., Starosta T., Kubo H., Barbe M., Houser S.R. Autologous c-Kit+ mesenchymal stem cell injections provide superior therapeutic benefit as compared to c-Kit+ cardiac-derived stem cells in a feline model of isoproterenol-induced cardiomyopathy. Clin. Transl. Sci. 2015; 8 (5): 425–431. DOI: 10.1111/cts.12251. PMID: 25684108Taghavi S., Sharp T.E.3rd, Duran J.M., Makarewich C.A., Berretta R.M., Starosta T., Kubo H., Barbe M., Houser S.R. Autologous c-Kit+ mesenchymal stem cell injections provide superior therapeutic benefit as compared to c-Kit+ cardiac-derived stem cells in a feline model of isoproterenolinduced cardiomyopathy. Clin. Transl. Sci. 2015; 8 (5): 425–431. DOI: 10.1111/cts.12251. PMID: 25684108Di Meglio F., Castaldo C., Nurzynska D., Miraglia R., Romano V., Russolillo V., Giuseppina L., Vosa C., Montagnani S. Localization and origin of cardiac CD117-positive cells: identification of a population of epicardiallyderived cells in adult human heart. Ital. J. Anat. Embryol. 2010; 115 (1–2): 71–78. PMID: 21072993Di Meglio F., Castaldo C., Nurzynska D., Miraglia R., Romano V., Russolillo V., Giuseppina L., Vosa C., Montagnani S. Localization and origin of cardiac CD117-positive cells: identification of a population of epicardiallyderived cells in adult human heart. Ital. J. Anat. Embryol. 2010; 115 (1–2): 71–78. PMID: 21072993Karantalis V., Hare J.M. Use of mesenchymal stem cells for therapy of cardiac disease. Circ. Res. 2015; 116 (8): 1413–1430. DOI: 10.1161/CIRCRESAHA.116.303614. PMID: 25858066Karantalis V., Hare J.M. Use of mesenchymal stem cells for therapy of cardiac disease. Circ. Res. 2015; 116 (8): 1413–1430. DOI: 10.1161/CIRCRESAHA.116.303614. PMID: 25858066Terashvili M., Bosnjak Z.J. Stem cell therapies in cardiovascular disease. J. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 2018; pii: S1053-0770(18)30281-7. [Epub ahead of print]. DOI: 10.1053/j.jvca.2018.04.048. PMID: 30029992Terashvili M., Bosnjak Z.J. Stem cell therapies in cardiovascular disease. J. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 2018; pii: S1053-0770(18)30281-7. [Epub ahead of print]. DOI: 10.1053/j.jvca.2018.04.048. PMID: 30029992Дергилев К.В., Рубина К.А., Парфенова Е.В. Резидентные стволовые клетки сердца. Кардиология. 2011; 51 (4): 84–92. PMID: 21623726Dergilev K.V., Rubina K.A., Parfenova E.V. Resident cardiac stem cells. Kardiologiia. 2011; 51 (4): 84–92. PMID: 21623726. [In Russ.]Konstandin M.H., Völkers M., Collins B., Quijada P., Quintana M., De La Torre A., Ormachea L., Din S., Gude N., Toko H., Sussman M.A. Fibronectin contributes to pathological cardiac hypertrophy but not physiological growth. Basic Res. Cardiol. 2013; 108 (5): 375. DOI: 10.1007/s00395013-0375-8. PMID: 23912225Konstandin M.H., Völkers M., Collins B., Quijada P., Quintana M., De La Torre A., Ormachea L., Din S., Gude N., Toko H., Sussman M.A. Fibronectin contributes to pathological cardiac hypertrophy but not physiological growth. Basic Res. Cardiol. 2013; 108 (5): 375. DOI: 10.1007/s00395013-0375-8. PMID: 23912225Muncie J.M., Weaver V.M. The physical and biochemical properties of the extracellular matrix regulate cell fate. Curr. Top. Dev. Biol. 2018; 130: 1–37. DOI: 10.1016/bs.ctdb.2018.02.002. PMID: 29853174Muncie J.M., Weaver V.M. The physical and biochemical properties of the extracellular matrix regulate cell fate. Curr. Top. Dev. Biol. 2018; 130: 1–37. DOI: 10.1016/bs.ctdb.2018.02.002. PMID: 29853174Lai H.J., Kuan C.H., Wu H.C., Tsai J.C., Chen T.M., Hsieh D.J., Wang T.W. Tailored design of electrospun composite nanofibers with staged release of multiple angiogenic growth factors for chronic wound healing. Acta Biomater. 2014; 10 (10): 4156–4166. DOI: 10.1016/j.actbio.2014.05.001. PMID: 24814882Lai H.J., Kuan C.H., Wu H.C., Tsai J.C., Chen T.M., Hsieh D.J., Wang T.W. Tailored design of electrospun composite nanofibers with staged release of multiple angiogenic growth factors for chronic wound healing. Acta Biomater. 2014; 10 (10): 4156–4166. DOI: 10.1016/j.actbio.2014.05.001. PMID: 24814882Stone O.A., Carter J.G., Lin P.C., Paleolog E., Machado M.J., Bates D.O. Differential regulation of blood flow-induced neovascularization and mural cell recruitment by vascular endothelial growth factor and angiopoietin signalling. J. Physiol. 2017; 595 (5): 1575–1591. DOI: 10.1113/JP273430. PMID: 27868196Stone O.A., Carter J.G., Lin P.C., Paleolog E., Machado M.J., Bates D.O. Differential regulation of blood flow-induced neovascularization and mural cell recruitment by vascular endothelial growth factor and angiopoietin signalling. J. Physiol. 2017; 595 (5): 1575–1591. DOI: 10.1113/JP273430. PMID: 27868196Brudno Y., Ennett-Shepard A.B., Chen R.R., Aizenberg M., Mooney D.J. Enhancing microvascular formation and vessel maturation through temporal control over multiple pro-angiogenic and pro-maturation factors. Biomaterials. 2013; 34 (36): 9201–9209. DOI: 10.1016/j.biomaterials.2013.08.007. PMID: 23972477Brudno Y., Ennett-Shepard A.B., Chen R.R., Aizenberg M., Mooney D.J. Enhancing microvascular formation and vessel maturation through temporal control over multiple pro-angiogenic and pro-maturation factors. Biomaterials. 2013; 34 (36): 9201–9209. DOI: 10.1016/j.biomaterials.2013.08.007. PMID: 23972477Makarevich P.I., Dergilev K.V., Tsokolaeva Z.I., Boldyreva M.A., Shevchenko E.K., Gluhanyuk E.V., Gallinger J.O., Menshikov M.Y., Parfyonova Y.V. Angiogenic and pleiotropic effects of VEGF165 and HGF combined gene therapy in a rat model of myocardial infarction. PLoS One. 2018; 13 (5): e0197566. DOI: 10.1371/journal.pone.0197566. PMID: 29787588Makarevich P.I., Dergilev K.V., Tsokolaeva Z.I., Boldyreva M.A., Shevchenko E.K., Gluhanyuk E.V., Gallinger J.O., Menshikov M.Y., Parfyonova Y.V. Angiogenic and pleiotropic effects of VEGF165 and HGF combined gene therapy in a rat model of myocardial infarction. PLoS One. 2018; 13 (5): e0197566. DOI: 10.1371/journal.pone.0197566. PMID: 29787588Szade A., Grochot-Przeczek A., Florczyk U., Jozkowicz A., Dulak J. Cellular and molecular mechanisms of inflammation-induced angiogenesis. IUBMB Life. 2015; 67 (3): 145–159. DOI: 10.1002/iub.1358. PMID: 25899846Szade A., Grochot-Przeczek A., Florczyk U., Jozkowicz A., Dulak J. Cellular and molecular mechanisms of inflammation-induced angiogenesis. IUBMB Life. 2015; 67 (3): 145–159. DOI: 10.1002/iub.1358. PMID: 25899846Karaman S., Leppänen V.M., Alitalo K. Vascular endothelial growth factor signaling in development and disease. Development. 2018; 145 (14): pii: dev151019. DOI: 10.1242/dev.151019. PMID: 30030240Karaman S., Leppänen V.M., Alitalo K. Vascular endothelial growth factor signaling in development and disease. Development. 2018; 145 (14): pii: dev151019. DOI: 10.1242/dev.151019. PMID: 30030240Morishita R., Aoki M., Hashiya N., Yamasaki K., Kurinami H., Shimizu S., Makino H., Takesya Y., Azuma J., Ogihara T. Therapeutic angiogenesis using hepatocyte growth factor (HGF). Curr. Gene Ther. 2004; 4 (2): 199–206. DOI: 10.2174/1566523043346453. PMID: 15180586Morishita R., Aoki M., Hashiya N., Yamasaki K., Kurinami H., Shimizu S., Makino H., Takesya Y., Azuma J., Ogihara T. Therapeutic angiogenesis using hepatocyte growth factor (HGF). Curr. Gene Ther. 2004; 4 (2): 199–206. DOI: 10.2174/1566523043346453. PMID: 15180586Morishita R., Nakamura S., Hayashi S., Taniyama Y., Moriguchi A., Nagano T., Taiji M., Noguchi H., Takeshita S., Matsumoto K., Nakamura T., Higaki J., Ogihara T. Therapeutic angiogenesis induced by human recombinant hepatocyte growth factor in rabbit hind limb ischemia model as cytokine supplement therapy. Hypertension. 1999; 33 (6): 1379–1384. DOI: 10.1161/01.HYP.33.6.1379. PMID: 10373220Morishita R., Nakamura S., Hayashi S., Taniyama Y., Moriguchi A., Nagano T., Taiji M., Noguchi H., Takeshita S., Matsumoto K., Nakamura T., Higaki J., Ogihara T. Therapeutic angiogenesis induced by human recombinant hepatocyte growth factor in rabbit hind limb ischemia model as cytokine supplement therapy. Hypertension. 1999; 33 (6): 1379–1384. DOI: 10.1161/01.HYP.33.6.1379. PMID: 10373220Yu J., Li M., Qu Z., Yan D., Li D., Ruan Q. SDF-1/CXCR4-mediated migration of transplanted bone marrow stromal cells toward areas of heart myocardial infarction through activation of PI3K/Akt. J. Cardiovasc. Pharmacol. 2010; 55 (5): 496–505. DOI: 10.1097/FJC.0b013e3181d7a384. PMID: 20179608Yu J., Li M., Qu Z., Yan D., Li D., Ruan Q. SDF-1/CXCR4-mediated migration of transplanted bone marrow stromal cells toward areas of heart myocardial infarction through activation of PI3K/Akt. J. Cardiovasc. Pharmacol. 2010; 55 (5): 496–505. DOI: 10.1097/FJC.0b013e3181d7a384. PMID: 20179608Linke A., Müller P., Nurzynska D., Casarsa C., Torella D., Nascimbene A., Castaldo C., Cascapera S., Böhm M., Quaini F., Urbanek K., Leri A., Hintze T.H., Kajstura J., Anversa P. Stem cells in the dog heart are self-renewing, clonogenic, and multipotent and regenerate infarcted myocardium, improving cardiac function. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005; 102 (25): 8966–8971. DOI: 10.1073/pnas.0502678102. PMID: 15951423Linke A., Müller P., Nurzynska D., Casarsa C., Torella D., Nascimbene A., Castaldo C., Cascapera S., Böhm M., Quaini F., Urbanek K., Leri A., Hintze T.H., Kajstura J., Anversa P. Stem cells in the dog heart are self-renewing, clonogenic, and multipotent and regenerate infarcted myocardium, improving cardiac function. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005; 102 (25): 8966–8971. DOI: 10.1073/pnas.0502678102. PMID: 15951423

The authors declare that there are no conflicts of interest present.