rmtОбщая реаниматологияGeneral Reanimatology1813-97792411-7110FSBI "SRIGR" RAMS10.15360/1813-9779-2022-2-76-82rmt-2215Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯEXPERIMENTAL STUDIESРоль рецептора активатора плазминогена урокиназного типа в регуляции ангиогенных свойств Sca1+ васкулогенных клеток-предшественницRole of Urokinase-Type Plasminogen Activator Receptor in the Regulation of Angiogenic Properties of Sca1+ Vasculogenic Progenitor CellsДергилевК. В.DergilevК. V.

Константин Владимирович Дергилев

Институт экспериментальной кардиологии

Лаборатория ангиогенеза

121552

ул. 3-я Черепковская, д. 15а

Москва

Медицинский колледж

Медицинское отделение

Центр регенеративной медицины

32610

M421, 1600 SW Арчер рд.

Соединенные Штаты Америки

Флорида

Гейнсвилл

Кonstantin V. Dergilev

Experimental Cardiology Institute

Laboratory of Angiogenesis

121552

15a Cherepkovskaya 3rd Str.

Moscow

College of Medicine

Department of Medicine

Center for Regenerative Medicine

1600 SW Archer Rd

USA

FL 32610

AM421 Gainesville

doctorkote@gmail.comЦоколаеваЗ. И.TsokolaevaZ. I.

Институт экспериментальной кардиологии

Лаборатория ангиогенеза

121552

ул. 3-я Черепковская, д. 15а

107031

ул. Петровка, д. 25, стр. 2

Москва

Zoya I. Tsokolaeva

Experimental Cardiology Institute

Laboratory of Angiogenesis

121552

15a Cherepkovskaya 3rd Str.

 V. A. Negovsky Research Institute of General Reanimatology

107031

25 Petrovka Str., Bldg. 2

Moscow

БелоглазоваИ. Б.BeloglazovaI. B.

Институт экспериментальной кардиологии

Лаборатория ангиогенеза

121552

ул. 3-я Черепковская, д. 15а

Москва

Irina B. Beloglazova

Experimental Cardiology Institute

Laboratory of Angiogenesis

121552

15a Cherepkovskaya 3rd Str.

Moscow

ВасилецЮ. Д.VasiletsYu. D.

Институт экспериментальной кардиологии

Лаборатория ангиогенеза

121552

ул. 3-я Черепковская, д. 15а

Москва

Yuliya D. Vasilets

Experimental Cardiology Institute

Laboratory of Angiogenesis

121552

15a Cherepkovskaya 3rd Str.

Moscow

ТрактуевД. О.TraktuevD. O.

Медицинский колледж

Медицинское отделение

Центр регенеративной медицины

32610

M421, 1600 SW Арчер рд.

Флорида

Гейнсвилл

Dmitry O. Traktuev

College of Medicine

Department of Medicine

Center for Regenerative Medicine

1600 SW Archer Rd

USA

FL 32610

AM421 Gainesville

КульбицкийБ. Н.KulbitskyN. B.

117418

ул. Цюрупы, д. 3

кафедра судебной медицины

117198

ул. Миклухо-Маклая, д. 6

Москва

117418

3 Tsyurupy Str.

117198

6 Miklukho-Maklaya Str.

Moscow

ПарфеноваЕ. В.ParfenovaE. V.

Институт экспериментальной кардиологии

Лаборатория ангиогенеза

121552

ул. 3-я Черепковская, д. 15а

119192

Ломоносовский пр-т, д. 27, стр. 1

Москва

 

Elena V. Parfenova

Experimental Cardiology Institute

Laboratory of Angiogenesis

121552

15a Cherepkovskaya 3rd Str.

Fundamental Medicine Department

Laboratory of Postgenomic Technologies in Medicine

119192

27 Lomonosovsky Ave., Bldg. 1

Moscow

Национальный медицинский исследовательский центр кардиологии Минздрава России; Университет ФлоридыРоссияNational Medical Research Center for Cardiology, Ministry of Health of Russia; University of FloridaRussian FederationНациональный медицинский исследовательский центр кардиологии Минздрава России; Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии (ФНКЦ РР)РоссияNational Medical Research Center for Cardiology, Ministry of Health of Russia; Federal Research and Clinical Center of Intensive Care Medicine and RehabilitologyRussian FederationНациональный медицинский исследовательский центр кардиологии Минздрава РоссииРоссияNational Medical Research Center for Cardiology, Ministry of Health of RussiaRussian FederationУниверситет ФлоридыСоединённые Штаты АмерикиUniversity of FloridaUnited StatesНИИ Морфологии человека; Российский университет дружбы народовРоссияResearch Institute of Human Morphology; Peoples Friendship University of RussiaRussian FederationНациональный медицинский исследовательский центр кардиологии Минздрава России; Московский Государственный университет им. М. В. ЛомоносоваРоссияNational Medical Research Center for Cardiology, Ministry of Health of Russia; Lomonosov Moscow State UniversityRussian Federation2022300420221827682Copyright © Дергилев К.В., Цоколаева З.И., Белоглазова И.Б., Василец Ю.Д., Трактуев Д.О., Кульбицкий Б.Н., Парфенова Е.В., 20222022Дергилев К.В., Цоколаева З.И., Белоглазова И.Б., Василец Ю.Д., Трактуев Д.О., Кульбицкий Б.Н., Парфенова Е.В.Dergilev К.V., Tsokolaeva Z.I., Beloglazova I.B., Vasilets Y.D., Traktuev D.O., Kulbitsky N.B., Parfenova E.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.reanimatology.com/rmt/article/view/2215

   Ключевым этапом, определяющим течение регенеративных процессов в постинфарктном сердце, является формирование новой сосудистой сети. Известно, что рецептор активатора плазминогена урокиназного типа (uPAR) играет важную роль в регуляции функций эндотелиальных клеток и процессах постнатального ангиогенеза. При этом его участие в регуляции свойств сосудистых клеток-предшественниц остается неизученным.   Цель исследования. Оценить экспрессию uPAR на поверхности резидентных кардиальных васкулогенных клеток-предшественников (ркВКП) и его влияние на ангиогенные свойства клеток in vitro, а также – постинфарктную васкуляризацию сердца.

   Материалы и методы

   Материалы и методы. В работе использовали модель инфаркта миокарда у мыши, иммунофлуоресцентные методы исследования криосрезов для проведения характеристики сосудов и ркВКП, оценку ангиогенных свойств васкулогенных клеток-предшественников методом «tube assay» и индукции дифференцировки в специализированной среде.   Результаты. Обнаружили, что большинство Sca-1+ ркВКП экспрессируют на своей поверхности урокиназный рецептор и маркеры эндотелиальных клеток, способны к пролиферации и интеграции в состав новообразованных сосудов в зоне повреждения, что указывает на возможное их участие в процессе васкуляризации после инфаркта. После острого ишемического повреждения в миокарде uPAR-/- животных наблюдали нарушение аккумуляции васкулогенных прогениторных клеток (8+2 и 27+7 клеток в поле зрения, соответственно; p = 0,032) и процессов васкуляризации (85+11 и 166+25 капилляров в поле зрения, соответственно; p = 0,033), в сравнении с животными дикого типа. Проведенные исследования показали, что Sca-1+ ркВКП, полученные из сердец uPAR-/-мышей, демонстрировали сниженную способность к формированию капилляроподобных структур и эндотелиальной дифференцировке, в сравнении с Sca-1+ ркВКП из сердец мышей дикого типа.   Заключение. Таким образом, дефицит uPAR может приводить к нарушению васкулогенных свойств Sca-1+ ркВКП, что, вероятно, связано с потерей регуляторного влияния специфических лигандов и способностью взаимодействовать с сигнальными медиаторами, такими как интегрины. С позиции регенеративной медицины модуляция активности uPAR может рассматриваться как потенциальная мишень для направленной регуляции свойств васкулогенных клеток-предшественниц и процессов постнатального ангиогенеза.

Хайлайт

Хайлайт

   Рецептор активатора плазминогена урокиназного типа вовлечен в регуляцию ангиогенных свойств Sca1+ васкулогенных клеток-предшественниц.

   Neoangiogenesis is the key process determining myocardial regeneration after infarction. The urokinase-type plasminogen activator receptor (uPAR) is known to play an important role in the regulation of endothelial cell function and postnatal angiogenesis. However, uPAR its involvement in the regulation of the properties of vascular progenitor cells remains poorly studied.   Aim: to evaluate uPAR expression on the surface of resident cardiac vascular progenitor cells (rcVPCs) and its impact on angiogenic cell properties in vitro as well as postinfarction cardiac vascularization.   Materials and Methods. We used immunofluorescent analysis of cryosections of a murine myocardial infarction model to characterize vessels and rcVPCs, and evaluatedв the angiogenic properties potential of vasculogenic progenitor cells using the «tube assay» and induction ofinducing differentiation in a specialized medium.   Results. We have found that the majority of Sca-1+ rcVPCs express the urokinase receptor and endothelial cell markers on their surface and are capable of proliferation and integration into the newly formed vessels in the injured area, indicating their possible involvement in thecontribution to vascularization process after infarction. After acute ischemic injury, the accumulation of vasculogenic progenitor cells (8+2 and 27+7 cells per visual field, respectively; P = 0.032) and vascularization processes (85+11 and 166+25 capillaries per visual field, respectively; P = 0.033) were observed in myocardium of uPAR-/- animals, compared with wild-type animals. Our studies demonstrated that Sca-1+ rcVCPs derived from uPAR-/- murine hearts demonstrated a reduced ability to form capillary-like structures and endothelial differentiation compared with Sca-1+ rcVCPs from hearts of wild-type mice.   Conclusion. Thus, uPAR deficiency may lead to impaired vasculogenic properties of Sca-1+ rcVCPs, which is likely due to the loss of regulatory influence of specific ligands and the ability to interact with signaling mediators such as integrins. From the viewpoint of regenerative medicine, the modulation of uPAR activity can be considered as a potential targetpromising approach for targeted regulation of vasculogenic progenitor cells properties and postnatal angiogenesis.

Highlight

   The urokinase-type plasminogen activator receptor is involved in the regulation of the angiogenic properties of Sca1+ vasculogenic progenitor cells.

урокиназный рецепторваскулогенные клеткиваскулогенезангиогенезurokinase receptorvasculogenic cellsvasculogenesisangiogenesisРабота выполнена при финансовой поддержке грантов РНФ 17-15-01368П и РФФИ 19-015-00231This work was supported by the Russian Science Foundation grants 17-15-01368P and RFBR 19-015-00231ReferencesArjmand B., Abedi M., Arabi M., Alavi-Moghadam S., Rezaei-Tavirani M., Hadavandkhani M., Tayanloo-Beik A., Kordi R., Roudsari P. P., Larijani B. Regenerative Medicine for the Treatment of Ischemic Heart Disease; Status and Future Perspectives. Front Cell Dev Biol. 2021; 9: 704903. DOI: 10.3389/fcell.2021.704903.Arjmand B., Abedi M., Arabi M., Alavi-Moghadam S., Rezaei-Tavirani M., Hadavandkhani M., Tayanloo-Beik A., Kordi R., Roudsari P. P., Larijani B. Regenerative Medicine for the Treatment of Ischemic Heart Disease; Status and Future Perspectives. Front Cell Dev Biol. 2021; 9: 704903. DOI: 10.3389/fcell.2021.704903.Vidal-Calés P., Cepas-Guillén P. L., Brugaletta S., Sabaté M. New Interventional Therapies beyond Stenting to Treat ST-Segment Elevation Acute Myocardial Infarction. J Cardiovasc Dev Dis. 2021; 8 (9): 100. DOI: 10.3390/jcdd8090100.Vidal-Calés P., Cepas-Guillén P. L., Brugaletta S., Sabaté M. New Interventional Therapies beyond Stenting to Treat ST-Segment Elevation Acute Myocardial Infarction. J Cardiovasc Dev Dis. 2021; 8 (9): 100. DOI: 10.3390/jcdd8090100.Viola M., de Jager S. C. A., Sluijter J. P. G. Targeting Inflammation after Myocardial Infarction: A Therapeutic Opportunity for Extracellular Vesicles? Int J Mol Sci. 2021; 22 (15): 7831. DOI: 10.3390/ijms22157831.Viola M., de Jager S. C. A., Sluijter J. P. G. Targeting Inflammation after Myocardial Infarction: A Therapeutic Opportunity for Extracellular Vesicles? Int J Mol Sci. 2021; 22 (15): 7831. DOI: 10.3390/ijms22157831.He L., Huang X., Kanisicak O., Li Yi., Wang Y., Li Y., Pu W., Liu Q., Zhang H., Tian X., Zhao H., Liu X., Zhang S., Nie Yu., Hu S., Miao X., Dong Wang Q., Wang F., Chen T., Xu Q., Lui K., Molkentin J. D, Zhou B. Preexisting endothelial cells mediate cardiac neovascularization after injury. J Clin Invest. 2017. DOI: 10.1172/JCI93868. PMID: 2865034. PMID: 28650345. PMCID: PMC5531398.He L., Huang X., Kanisicak O., Li Yi., Wang Y., Li Y., Pu W., Liu Q., Zhang H., Tian X., Zhao H., Liu X., Zhang S., Nie Yu., Hu S., Miao X., Dong Wang Q., Wang F., Chen T., Xu Q., Lui K., Molkentin J. D, Zhou B. Preexisting endothelial cells mediate cardiac neovascularization after injury. J Clin Invest. 2017. DOI: 10.1172/JCI93868. PMID: 2865034. PMID: 28650345. PMCID: PMC5531398.Дергилев К. В. Характеристика ангиогенных свойств с-kit+ клеток миокарда / К. В. Дергилев [и др.] // Гены и клетки. – 2018. – 14 (3): 86–93. DOI: 10.23868/201811038.Дергилев К. В. Характеристика ангиогенных свойств с-kit+ клеток миокарда / К. В. Дергилев [и др.] // Гены и клетки. – 2018. – 14 (3): 86–93. DOI: 10.23868/201811038.Scalise M., Marino F., Cianflone E., Mancuso T., Marotta P., Aquila I., Torella M., Nadal-Ginard B., Torella D. Heterogeneity of Adult Cardiac Stem Cells. Adv Exp Med Biol. 2019; 1169: 141–178. DOI: 10.1007/978-3-030-24108-7_8. PMID: 31487023.Scalise M., Marino F., Cianflone E., Mancuso T., Marotta P., Aquila I., Torella M., Nadal-Ginard B., Torella D. Heterogeneity of Adult Cardiac Stem Cells. Adv Exp Med Biol. 2019; 1169: 141–178. DOI: 10.1007/978-3-030-24108-7_8. PMID: 31487023.Bhartiya D., Flora Y., Sharma D., Mohammad S. A. Two Stem Cell Populations Including VSELs and CSCs Detected in the Pericardium of Adult Mouse Heart. Stem Cell Rev Rep. 2021; 17 (2): 685–693. DOI: 10.1007/s12015-021-10119-9.Bhartiya D., Flora Y., Sharma D., Mohammad S. A. Two Stem Cell Populations Including VSELs and CSCs Detected in the Pericardium of Adult Mouse Heart. Stem Cell Rev Rep. 2021; 17 (2): 685–693. DOI: 10.1007/s12015-021-10119-9.Iancu C. B., Iancu D., Renţea I., Hostiuc S., Dermengiu D., Rusu M. C. Molecular signatures of cardiac stem cells. Rom J Morphol Embryol. 2015; 56 (4): 1255–1262. PMID: 26743269.Iancu C. B., Iancu D., Renţea I., Hostiuc S., Dermengiu D., Rusu M. C. Molecular signatures of cardiac stem cells. Rom J Morphol Embryol. 2015; 56 (4): 1255–1262. PMID: 26743269.Santi L. A., Napolitano F., Montuori N., Ragno P. The Urokinase Recep-tor: A Multifunctional Receptor in Cancer Cell Biology. Therapeutic Implications. Int J Mol Sci. 2021; 22 (8): 4111. DOI: 10.3390/ijms22084111. PMID: 33923400. PMCID: PMC8073738.Santi L. A., Napolitano F., Montuori N., Ragno P. The Urokinase Recep-tor: A Multifunctional Receptor in Cancer Cell Biology. Therapeutic Implications. Int J Mol Sci. 2021; 22 (8): 4111. DOI: 10.3390/ijms22084111. PMID: 33923400. PMCID: PMC8073738.Dergilev K. V., Stepanova V. V., Beloglazova I. B., Tsokolayev Z. I., Parfenova E. V. Multifaced Roles of the Urokinase System in the Regulation of Stem Cell Niches. Acta Naturae. 2018; 10 (4): 19–32. PMID: 30713759. PMCID: PMC6351041.Dergilev K. V., Stepanova V. V., Beloglazova I. B., Tsokolayev Z. I., Parfenova E. V. Multifaced Roles of the Urokinase System in the Regulation of Stem Cell Niches. Acta Naturae. 2018; 10 (4): 19–32. PMID: 30713759. PMCID: PMC6351041.Baart V. M., Houvast R. D., de Geus-Oei L. F., Quax P. H. A., Kuppen P. J. K., Vahrmeijer A. L, Sier C. F. M. Molecular imaging of the urokinase plasminogen activator receptor: opportunities beyond cancer. EJNMMI Res. 2020; 10 (1): 87. DOI: 10.1186/s13550-020-00673-7. PMID: 32725278. PMCID: PMC7387399.Baart V. M., Houvast R. D., de Geus-Oei L. F., Quax P. H. A., Kuppen P. J. K., Vahrmeijer A. L, Sier C. F. M. Molecular imaging of the urokinase plasminogen activator receptor: opportunities beyond cancer. EJNMMI Res. 2020; 10 (1): 87. DOI: 10.1186/s13550-020-00673-7. PMID: 32725278. PMCID: PMC7387399.Dewerchin M., Nuffelen A. V., Wallays G., Bouché A., Moons L., Carmeliet P., Mulligan R. C., Collen D. Generation and characterization of urokinase receptor-deficient mice. J Clin Invest. 1996; 97 (3): 870–878. PMID: 8609247. PMCID: PMC507128. DOI: 10.1172/JCI118489.Dewerchin M., Nuffelen A. V., Wallays G., Bouché A., Moons L., Carmeliet P., Mulligan R. C., Collen D. Generation and characterization of urokinase receptor-deficient mice. J Clin Invest. 1996; 97 (3): 870–878. PMID: 8609247. PMCID: PMC507128. DOI: 10.1172/JCI118489.Dergilev K. V., Tsokolaeva Z. I., Beloglazova I. B., Ratner E. I., Molokotina Yu. D., Parfenova E. V. Angiogenic properties of myocardial c-kit+ cells. Genes & Cells. 2018; 13 (3): 82–88. DOI: 10.23868/201811038.Dergilev K. V., Tsokolaeva Z. I., Beloglazova I. B., Ratner E. I., Molokotina Yu. D., Parfenova E. V. Angiogenic properties of myocardial c-kit+ cells. Genes & Cells. 2018; 13 (3): 82–88. DOI: 10.23868/201811038.Xiao Q., Zeng L., Zhang Z., Margariti A., Ali Z. A., Channon K. M., Xu Q., Hu Y. Sca-1+ progenitors derived from embryonic stem cells differentiate into endothelial cells capable of vascular repair after arterial injury. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2006; 26 (10): 2244–2251. DOI: 10.1161/01.ATV.0000240251.50215.50.Xiao Q., Zeng L., Zhang Z., Margariti A., Ali Z. A., Channon K. M., Xu Q., Hu Y. Sca-1+ progenitors derived from embryonic stem cells differentiate into endothelial cells capable of vascular repair after arterial injury. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2006; 26 (10): 2244–2251. DOI: 10.1161/01.ATV.0000240251.50215.50.Dergilev K. V., Tsokolaeva Z. I., Beloglazova I. B., Zubkova E. S., Ratner E. I., Molokotina Y. D., Parfenova E. V. Urokinase Receptor Regulates Adhesion of Progenitor Cardiac Cells to Vitronectin. Bull Exp Biol Med. 2019; 167 (3): 315–319. DOI: 10.1007/s10517-019-04517-w. PMID: 31346863.Dergilev K. V., Tsokolaeva Z. I., Beloglazova I. B., Zubkova E. S., Ratner E. I., Molokotina Y. D., Parfenova E. V. Urokinase Receptor Regulates Adhesion of Progenitor Cardiac Cells to Vitronectin. Bull Exp Biol Med. 2019; 167 (3): 315–319. DOI: 10.1007/s10517-019-04517-w. PMID: 31346863.Li Santi A., Napolitano F., Montuori N., Ragno P. The Urokinase Receptor: A Multifunctional Receptor in Cancer Cell Biology. Therapeutic Implications. Int J Mol Sci. 2021; 22 (8): 4111. DOI: 10.3390/ijms22084111.Li Santi A., Napolitano F., Montuori N., Ragno P. The Urokinase Receptor: A Multifunctional Receptor in Cancer Cell Biology. Therapeutic Implications. Int J Mol Sci. 2021; 22 (8): 4111. DOI: 10.3390/ijms22084111.Jia C., Malone H. M., Keasey M. P., Lovins C., Elam J., Hagg T. Blood Vitronectin Induces Detrimental Brain Interleukin-6 and Correlates With Outcomes After Stroke Only in Female Mice. Stroke. 2020; 51 (5): 1587–1595. DOI: 10.1161/STROKEAHA.120.029036.Jia C., Malone H. M., Keasey M. P., Lovins C., Elam J., Hagg T. Blood Vitronectin Induces Detrimental Brain Interleukin-6 and Correlates With Outcomes After Stroke Only in Female Mice. Stroke. 2020; 51 (5): 1587–1595. DOI: 10.1161/STROKEAHA.120.029036.Keasey M. P., Jia C., Pimentel L. F., Sante R. R., Lovins C., Hagg T. Blood vitronectin is a major activator of LIF and IL-6 in the brain through integrin-FAK and uPAR signaling. J Cell Sci. 2018; 131 (3): jcs202580. DOI: 10.1242/jcs.202580.Keasey M. P., Jia C., Pimentel L. F., Sante R. R., Lovins C., Hagg T. Blood vitronectin is a major activator of LIF and IL-6 in the brain through integrin-FAK and uPAR signaling. J Cell Sci. 2018; 131 (3): jcs202580. DOI: 10.1242/jcs.202580.Napolitano F., Montuori N. The Role of the Plasminogen Activation System in Angioedema: Novel Insights on the Pathogenesis. J Clin Med. 2021; 10 (3): 518. DOI: 10.3390/jcm10030518.Napolitano F., Montuori N. The Role of the Plasminogen Activation System in Angioedema: Novel Insights on the Pathogenesis. J Clin Med. 2021; 10 (3): 518. DOI: 10.3390/jcm10030518.Gorrasi A., Petrone A. M., Li Santi A., Alfieri M., Montuori N., Ragno P. New Pieces in the Puzzle of uPAR Role in Cell Migration Mechanisms. Cells. 2020; 9 (12): 2531. DOI: 10.3390/cells9122531.Gorrasi A., Petrone A. M., Li Santi A., Alfieri M., Montuori N., Ragno P. New Pieces in the Puzzle of uPAR Role in Cell Migration Mechanisms. Cells. 2020; 9 (12): 2531. DOI: 10.3390/cells9122531.Heydarkhan-Hagvall S., Gluck J. M., Delman C., Jung M., Ehsani N., Full S., Shemin R. J. The effect of vitronectin on the differentiation of embryonic stem cells in a 3D culture system. Biomaterials. 2012 (7): 2032–2040. DOI: 10.1016/j.biomaterials.2011.11.065. PMID: 22169822. PMCID: PMC7731733.Heydarkhan-Hagvall S., Gluck J. M., Delman C., Jung M., Ehsani N., Full S., Shemin R. J. The effect of vitronectin on the differentiation of embryonic stem cells in a 3D culture system. Biomaterials. 2012 (7): 2032–2040. DOI: 10.1016/j.biomaterials.2011.11.065. PMID: 22169822. PMCID: PMC7731733.Ferraris G. M., Schulte C., Buttiglione V., De Lorenzi V., Piontini A., Galluzzi M., Podestà A., Madsen C. D., Sidenius N. The interaction between uPAR and vitronectin triggers ligand-independent adhesion signalling by integrins. EMBO J. 2014; 33 (21): 2458–2472. DOI: 10.15252/embj.201387611. PMID: 25168639.Ferraris G. M., Schulte C., Buttiglione V., De Lorenzi V., Piontini A., Galluzzi M., Podestà A., Madsen C. D., Sidenius N. The interaction between uPAR and vitronectin triggers ligand-independent adhesion signalling by integrins. EMBO J. 2014; 33 (21): 2458–2472. DOI: 10.15252/embj.201387611. PMID: 25168639.Chillà A., Margheri F., Biagioni A., Del Rosso M., Fibbi G., Laurenzana A. Mature and progenitor endothelial cells perform angiogenesis also under protease inhibition: the amoeboid angiogenesis. J Exp Clin Cancer Res. 2018; 37 (1): 74. DOI: 10.1186/s13046-018-0742-2.Chillà A., Margheri F., Biagioni A., Del Rosso M., Fibbi G., Laurenzana A. Mature and progenitor endothelial cells perform angiogenesis also under protease inhibition: the amoeboid angiogenesis. J Exp Clin Cancer Res. 2018; 37 (1): 74. DOI: 10.1186/s13046-018-0742-2.Manetti M., Rosa I., Fazi M., Guiducci S., Carmeliet P., Ibba-Manneschi L., Matucci-Cerinic M. Systemic sclerosis-like histopathological features in the myocardium of uPAR-deficient mice. Ann Rheum Dis. 2016; 75 (2): 474–478. DOI: 10.1136/annrheumdis-2015-207803 PMID: 26269399.Manetti M., Rosa I., Fazi M., Guiducci S., Carmeliet P., Ibba-Manneschi L., Matucci-Cerinic M. Systemic sclerosis-like histopathological features in the myocardium of uPAR-deficient mice. Ann Rheum Dis. 2016; 75 (2): 474–478. DOI: 10.1136/annrheumdis-2015-207803 PMID: 26269399.Manetti M., Rosa I., Milia A. F., Guiducci S., Carmeliet P., Ibba-Manneschi L., Matucci-Cerinic M. Inactivation of urokinase-type plasminogen activator receptor (uPAR) gene induces dermal and pulmonary fibrosis and peripheral microvasculopathy in mice: a new model of experimental scleroderma? Ann Rheum Dis. 2014; 73 (9): 1700–1709. DOI: 10.1136/annrheumdis-2013-203706. PMID: 23852693.Manetti M., Rosa I., Milia A. F., Guiducci S., Carmeliet P., Ibba-Manneschi L., Matucci-Cerinic M. Inactivation of urokinase-type plasminogen activator receptor (uPAR) gene induces dermal and pulmonary fibrosis and peripheral microvasculopathy in mice: a new model of experimental scleroderma? Ann Rheum Dis. 2014; 73 (9): 1700–1709. DOI: 10.1136/annrheumdis-2013-203706. PMID: 23852693.D’Alessio S., Fibbi G., Cinelli M., Guiducci S., Del Rosso A., Margheri F., Serratì S., Pucci M., Kahaleh B., Fan P., Annunziato F., Cosmi L., Liotta F., Matucci-Cerinic M., Del Rosso M. Matrix metalloproteinase 12-dependent cleavage of urokinase receptor in systemic sclerosis microvascular endothelial cells results in impaired angiogenesis. Arthritis Rheum. 2004; 50 (10): 3275–3285. DOI: 10.1002/art.20562. PMID: 15476218.D’Alessio S., Fibbi G., Cinelli M., Guiducci S., Del Rosso A., Margheri F., Serratì S., Pucci M., Kahaleh B., Fan P., Annunziato F., Cosmi L., Liotta F., Matucci-Cerinic M., Del Rosso M. Matrix metalloproteinase 12-dependent cleavage of urokinase receptor in systemic sclerosis microvascular endothelial cells results in impaired angiogenesis. Arthritis Rheum. 2004; 50 (10): 3275–3285. DOI: 10.1002/art.20562. PMID: 15476218.Serratì S., Cinelli M., Margheri F., Guiducci S., Del Rosso A., Pucci M., Fibbi G., Bazzichi L., Bombardieri S., Matucci-Cerinic M., Del Rosso M. Systemic sclerosis fibroblasts inhibit in vitro angiogenesis by MMP-12-dependent cleavage of the endothelial cell urokinase receptor. J Pathol. 2006; 210 (2): 240–248. DOI: 10.1002/path.2048. PMID: 16917801.Serratì S., Cinelli M., Margheri F., Guiducci S., Del Rosso A., Pucci M., Fibbi G., Bazzichi L., Bombardieri S., Matucci-Cerinic M., Del Rosso M. Systemic sclerosis fibroblasts inhibit in vitro angiogenesis by MMP-12-dependent cleavage of the endothelial cell urokinase receptor. J Pathol. 2006; 210 (2): 240–248. DOI: 10.1002/path.2048. PMID: 16917801.Margheri F., Luciani C., Taddei M. L., Giannoni E., Laurenzana A., Biagioni A., Chillà A., Chiarugi P., Fibbi G., Del Rosso M. The receptor for urokinase-plasminogen activator (uPAR) controls plasticity of cancer cell movement in mesenchymal and amoeboid migration style. Oncotarget. 2014 30; 5 (6): 1538–1553. DOI: 10.18632/oncotarget.1754. PMID: 24681666.Margheri F., Luciani C., Taddei M. L., Giannoni E., Laurenzana A., Biagioni A., Chillà A., Chiarugi P., Fibbi G., Del Rosso M. The receptor for urokinase-plasminogen activator (uPAR) controls plasticity of cancer cell movement in mesenchymal and amoeboid migration style. Oncotarget. 2014 30; 5 (6): 1538–1553. DOI: 10.18632/oncotarget.1754. PMID: 24681666.Bernstein A. M., Twining S. S., Warejcka D. J., Tall E., Masur S. K. Urokinase receptor cleavage: a crucial step in fibroblast-to-myofibroblast differentiation. Mol Biol Cell. 2007; 18 (7): 2716–2727. DOI: 10.1091/mbc.e06-10-0912. PMID: 17507651.Bernstein A. M., Twining S. S., Warejcka D. J., Tall E., Masur S. K. Urokinase receptor cleavage: a crucial step in fibroblast-to-myofibroblast differentiation. Mol Biol Cell. 2007; 18 (7): 2716–2727. DOI: 10.1091/mbc.e06-10-0912. PMID: 17507651.Bernstein A. M., Greenberg R. S., Taliana L., Masur S. K. Urokinase anchors uPAR to the actin cytoskeleton. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2004; 45 (9): 2967–2977. DOI: 10.1167/iovs.04-0030. PMID: 15326109.Bernstein A. M., Greenberg R. S., Taliana L., Masur S. K. Urokinase anchors uPAR to the actin cytoskeleton. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2004; 45 (9): 2967–2977. DOI: 10.1167/iovs.04-0030. PMID: 15326109.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.