Цель настоящего исследования — определить прогностическую ценность показателей обмена холестерина, свободно-радикальных процессов и ДНК повреждений у пострадавших в ранние сроки после тяжелой сочетанной травмы. Материал и методы. В исследование были включены 77 человек, перенесших тяжелую механическую травму. Тяжесть состояния больных по шкале APACHE II при поступлении составила 19,1±5,4 баллов. Всех больных в зависимости от исхода заболевания разделили на 2 группы: I — умершие, II — выжившие. Исследование осуществляли при поступлении в реанимационное отделение на 3-и, 5-е, 7-е и 15-е сутки. Уровень ДНК-повреждений в клетках крови, а также процент апоптотических и некротических клеток крови оценивали методом гель-электрофореза изолированных клеток (метод «ДНК-комет»). Для оценки содержания 8-гидрокси-2-деоксигуанозина в ДНК клеток использовали набор «Human 8-oxoGuanine DNA Glycosylase (OGG1) FLARE Assay». Определение холестеринового и общего антиокислительного статуса, биохимических показателей производили на автоматическом биохимическом анализаторе Cobas Miras Plus. Холестерин липопротеидов очень низкой плотности (ЛПОНП) и липопротеи-дов низкой плотности (ЛПНП) определяли расчетным методом. Результаты и обсуждение. При тяжелой сочетанной травме наблюдается увеличение повреждений ДНК в клетках крови и усиление процессов апоптоза и некроза клеток в крови, которые особенно выражены на 3—5-е сутки. В группе умерших отмечается увеличение 8-гидрокси-2-дезоксигуанозина выше нормы на 5-е и 7-е сутки. Общий антиокислительный статус был при поступлении у выживших и умерших больных ниже нормальных значений и имел тенденцию к снижению в процессе наблюдения в обеих группах. Среднестатистические значения общего холестерина были снижены на всех этапах исследования. Концентрация триглециридов и ЛПОНП у всех больных на этапах исследования была в пределах нормальных значений. В группе выживших больных содержание ЛПНП в первую неделю наблюдения было в пределах нормы и выше, чем в группе умерших. Изменения со стороны липопротеидов высокой плотности характеризовались уменьшением их содержания в плазме на всем протяжении наблюдения за пострадавшими. В обеих группах активность щелочной фосфатазы увеличивалась в динамике и на 15-е сутки становилась в 1,5—2 раза выше нормальных значений. У выживших больных при поступлении активность у-глютамилтрансферазы (ГГТ) была в пределах нормальных значений. Динамика активности фермента в этой группе имеет тенденцию к увеличению, как и содержание общего белка в плазме этих больных. Заключение. При ТСТ наблюдается увеличение процессов ДНК-повреждений, ассоциирующееся с усилением клеточной гибели. Динамика изменения общего холестерина, холестерина ЛПНП, общего белка, активности у-ГГТ и 8-гидрокси-2-дезоксигуанозина может использоваться в качестве прогностических признаков. Ключевые слова: апоптоз, некроз, ДНК-повреждения, 8-гидрокси-2-дезок-сигуанозин, обмен холестерина, травма.
Objective: to study a number of free-radical reactions, the parameters of cholesterol exchange, and the extent of blood cell DNA damages in victims early after concomitant injury. Subjects and methods. The study covered 77 patients who had experienced severe mechanical injury. The patients’ condition on admission was an APACHE II of 19.1±5.4 scores. According to the outcome of the disease, all the patients were divided into 2 groups: 1) deceased patients and 2) survivors. The study was conducted on admission to an intensive care unit and on days 3, 5, 7, and 15. The extent of blood cell DNA damages and the proportion of apoptotic and necrotic blood cells were estimated by gel isolated cell elec-trophoresis (DNA rocket electrophoresis). The «Human 8-oxoGuanine DNA Glycosylate (OGG1) FLARE Assay» kit was used to measure the content of 8-hydroxy-2-deoxyguanosine in cell DNA. The cholesterol and overall antioxida-tive statuses and biochemical parameters were determined on an automatic biochemical Cobas Miras Plus analyzer. Very low-density lipoproteins (VLDL) and low-density lipoproteins (LDL) were calculated. Results and discussion. In severe concomitant injury, there were increases in DNA damages in the blood cells and in their apoptotic and necrotic processes, which were particularly pronounced on days 3—5. In the group of deceased patients, the increase of 8-hydroxy-2-deoxyguanosine was greater than the normal values on days 5 and 7. On admission, the systemic antioxidative status was greater than the normal values in the survivors and deceased patients and tended to diminish in both groups during an observation. The average statistical values of total cholesterol were lower at all stages of the study. At the stages of the study, the concentration of triglycerides and VLDL were in the normal range in all the patients. At week 1 of the observation, the level of LDL was normal or greater in the survivors than in the deceased. The changes in high-density lipoproteins were characterized by their decreased plasma levels throughout the observation of the victims. In both groups, the activity of alkaline phosphatase increased over time and was 1.5—2 times higher than the normal values on days 15. In the survivors, the admission activity of y-glutamyltransferase (y-GT) was in the normal range. The activity of the enzyme in this group tended to increase, so did the plasma level of total protein in these patients. Conclusion. In severe concomitant injury, there is an increase in DNA damage processes, which is associated with the enhanced cell death. The time course of changes in the levels of total cholesterol, LDL cholesterol, and total protein and in the activities of y-GT and 8-hydroxy-2-deoxyguanosine may be used as predictors. Key words: apoptosis, necrosis, DNA damage, 8-hydroxy-2-deoxyguanosine, cholesterol exchange, injury.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.