Морфологические особенности эритроцитов у больных с тяжелой сочетанной травмой

Цель исследования — выявить изменения структуры и формы эритроцитов в зависимости от объема кровопотери у больных, перенесших тяжелую сочетанную травму. Материалы и методы. Обследовано 18 больных (9 мужчин, 9 женщин) в возрасте 48,6±16,1 лет, перенесших тяжелую сочетанную механическую травму (ТСТ) с различными объемами потери крови и нарушениями гемодинамики. В зависимости от объема кровопотери пострадавшие были разделены на две группы: 1-я группа — 7 пострадавших — объем потери крови <750 мл (5,7±1,9 мл/кг) — кровопотеря (КП) I степени тяжести (СТ); 2-я группа — 11 пострадавших — объем потери крови >2000 мл (37,5±5,1 мл/кг) — КП IV СТ. В группу сравнения вошли 5 практически здоровых добровольцев, средний возраст которых составил 26,4±2,7 года. Исследование форм и размеров эритроцитов проводили методами светооптической и атомно-силовой микроскопии (АСМ). Для изучения состава эритроцитов десять микролитров цельной крови наносили на предметное стекло и готовили монослои эритроцитов с помощью прибора «V-sampler». Сканирование поверхности мембраны методом АСМ проводили в полуконтактном резонансном режиме. Использовали кантилеверы NSGL 01-A с резонансной частотой в диапазоне 80—200 кГц, радиус зонда — 10 нм, число точек сканирования 512 и 1024, поля сканирования 100X100 мкм, 10X10 мкм. Изображения получали в плоском формате и в формате 3D. Результаты. В группе сравнения при подсчете 1000 клеток методами светооптической микроскопии и АСМ получены достоверные отличия количества макро-и микроцитов. В поле 100X100 мкм выявлены соответственно следующие формы эритроцитов: дискоциты (97,9±1,5% и 96±5%), эхиноциты (2,1±0,9% и 3±1%), плоские клетки (0,1±0,02% и 1±0,5%). В первые сутки после травмы в группе пострадавших снижено количество нормоцитов; увеличено количество макроцитов и микроцитов по отношению к группе сравнения. При АСМ в поле 100X100 мкм у пострадавших с ТСТ в день поступления в реаниматологическое отделение выявлено достоверное уменьшение количества дискоцитов и увеличение количества эхиноцитов, стоматоци-тов и плоских клеток относительно группы сравнения. Плоские клетки, вероятнее всего, являются разновидностью молодых форм эритроцитов. Анизоцитоз и пойкилоцитоз зависел от степени кровопотери. Значительное увеличение количества макроцитов и плоских клеток на 5-й день наблюдения, вероятнее всего, отражает компенсаторное усиление эритропоэза в ответ на кровопотерю. При изучении форм эритроцитов в первые сутки после травмы в поле АСМ выявлены дискоциты с углубленным пэллором и выростом в центре. Выявлены существенные изменения наноструктуры мембран эритроцитов в первый день после травмы: среднее значение высоты первого порядка (h^) повышено почти в 9 раз, второго порядка (h2) — ~ в 1,5 раза, третьего порядка (h3) — ~ в 3 раза. Величина изменений h и h3 зависит от объема кровопотери. Заключение. У пострадавших с тяжелой сочетанной травмой наблюдается ярко выраженный анизоцитоз и пойкилоцитоз. Изменения связаны с объемом кровопотери. Были обнаружены дискоциты с углубленным пэллором и выростом в центре. Обнаружены изменения высот наноструктуры мембран эритроцитов. Ключевые слова: тяжелая сочетанная травма, кровопотеря, атомно-силовая микроскопия, светооптическая микроскопия, наноструктура мембран эритроцитов.

1. Рябов Г.А.

2. Герасимов Л.В., Саморуков В.Ю., Мороз В.В., Иванова Г.П.Применение эритропоэтина у больных с травмой и кровопотерей.Общая реаниматология.2012; 8 (5): 11—18.

3. Мороз В.В., Атауллаханов Ф.И., Радаев С.М., Остапченко Д.А.Влияние перфторана на морфологию и реологические свойства эритроцитов у больных с тяжелой травмой и кровопотерей.Анестезиология и реаниматология.2001; 6: 22—25.

4. Еликов А.В., Цапок П.И.Оксидантный баланс в эритроцитах у больных с переломами костей голени и бедра в зависимости от срока иммобилизации.Казанскиймед. журн.2011; 92 (4): 508—510.

5. Chien S., Skalak R, Chen P.H.Effect of hematocrit and rouleaux on apparent viscosity in capillaries.Biorheology.1972; 9 (2): 67—82.

6. Радаев С.М., Остапченко Д.А., Розенберг Ю.М., Лисовская И.Л., Мороз В.В., Атауллаханов Ф.И.Влияние перфторана на структурные и функциональные свойства эритроцитов у больных с травмой и кро-вопотерей.Биомедицинскийжурнал.2004; 5 (27): 104—108.

7. Bessis M.Atlas of red blood cell shapes. Berlin, Heidelberg, NewYork: Springer-Verlag; 1974: 21 — 101.

8. Мороз В.В., Черныш А.М., Яминский И.В., Козлова Е.К., Киселёв Г.А., Филонов А.С., Богушевич М.С., Гудкова О.Е.Перспективы применения методов атомной силовой микроскопии в реаниматологии.Общая реаниматология.2008; 4 (4): 51—54.

9. Бахтизин Р.З.Сканирующая туннельная микроскопия &#8212; новый метод изучения поверхности твердых тел.Соросовскийобразовательныйжурн.2000; 6 (11): 1—7.

10. Lapshin R.V.Rapid communication, availability of feature-oriented scanning probe microscopy for remote controlled measurements on board a space laboratory or planet exploration rover.Astrobiology.2009; 9 (5): 437—442.

11. МорозВ.В., ЧернышА.М., КозловаЕ.К., КирсановаА.К., Новодерж-кинаИ.С., АлександринВ.В., БорщеговскаяП.Ю., БлизнюкУ.А., Ры-саеваР.М.Атомная силовая микроскопия структуры мембран эритроцитов при острой кровопотере и реинфузии.Общая реаниматология.2009; 5 (5): 5—9.

12. Гетманенко Н.Ю., Галайченко Е.Н., Рожицкий Н.Н.Атомно-силовой микроскоп как инструмент исследования структуры поверхности эритроцитов.Вост.- Евр. журн. передовых технологий.2009; 4/10 (40): 7—10.

13. MorozV.V.,ChernyshA.M.,KozlovaE.K.,BorshegovskayaP.Yu.,BliznjukUA.,RysaevaR.M.,GudkovaO.Y.Comparison of red blood cell membrane microstructure after different physicochemical influences: atomic force microscope research.J. Crit. Care.2010; 25 (3): 512—531.

14. Мороз В.В., Черныш А.М., Козлова Е.К., Сергунова В.А., Гудкова О.Е., Федорова М.С., Кирсанова А.К., Новодержкина И.С.Нарушения наноструктуры мембран эритроцитов при острой кровопотере и их коррекция перфторуглеродной эмульсией.Общая реаниматология.2011; 7 (2): 5—9.

15. Мороз В.В., Голубев А.М., Черныш А.М., Козлова Е.К., Васильев В.Ю., Гудкова О.Е., Сергунова ВА., Фёдорова М.С.Изменения структуры поверхности мембран эритроцитов при длительном хранении донорской крови.Общая реаниматология.2012; 8 (1): 5—12.

16. Мороз В.В., Голубев А.М., Афанасьев А.В., Кузовлев А.Н., Сергунова ВА., Гудкова О.Е., Черныш А.М.Строение и функция эритроцита в норме и при критических состояниях.Общая реаниматология.2012; 8 (1): 52—60.

17. Мороз В.В., Козлова Е.К., Черныш А.М., Гудкова О.Е., Бушуева А.В.Изменения структуры мембран эритроцитов при действии гемина.Общая реаниматология.2012; 8 (6): 5—10.

18. Мороз В.В., Голубев А.М., Козлова Е.К., Афанасьев А.В., Гудкова О. Е., Новодержкина И.С., Марченков Ю.В., Кузовлев А.Н., Заржецкий Ю.В., Костин А.И., Волков Д.П., Яковлев В.Н.Динамика морфологических изменений эритроцитов и биохимических показателей консервированной цельной крови в различные сроки хранения.Общая реаниматология.2013; 9 (1): 5—13.

19. Воробьёв А.И., Городецкий В.М., Шулутко Е.М., Васильев СА.Острая массивная кровопотеря. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2001.

20. Гольдберг Д.И., Гольдберг ЕД.Справочник по гематологии с атласом микрофотограмм. Томск: ТГУ; 1971.

21. Горионов А.С., Борисова А.Г., Рожков С.П., Суханова ГА., Рожкова Н.Н.Морфология и агрегация эритроцитов в нанодисперсиях углерода.Экспериментальная биология.2009; 3: 30—37.

22. Гланц С.Медико-биологическая статистика. M.: Практика; 1999.

23. Леонова Е.В.,Чантурия А.В., Висмонт Ф.И.Патофизиология системы крови Mинск: БгМУ; 2009: 13.